摘要:
目的：探讨通络化痰胶囊对过氧化氢（H2O2）所致的大鼠嗜铬瘤细胞（PC12）细胞凋亡的保护作用及机制。方法：PC12细胞常规培养后,首先通过MTT检测细胞存活率的方法进行H2O2损伤模型的摸索和通络化痰胶囊药物浓度的筛选;确定造成PC12细胞损伤的H2O2浓度和通络化痰胶囊的安全作用浓度后,将处于对数生长期的PC12细胞分为对照组、模型组和通络化痰胶囊6.25,12.5,25,50,100mg.L-15个治疗组。用200μmol.L-1H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞存活率、Hoechst33342荧光核染色观察细胞凋亡形态学改变、流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率、Western blot方法检测与细胞凋亡线粒体途径密切相关的蛋白细胞色素C（CytC）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）表达的变化。结果：200μmol.L-1H2O2诱导PC12细胞损伤明显,浓度小于等于100 mg.L-1的通络化痰胶囊浓度对正常PC12细胞的存活率没有抑制作用。与模型组比较,各通络化痰治疗组PC12细胞存活率提高（P〈0.01）,凋亡率下降（P〈0.01）,Cytc和Caspase-3的表达减少（P〈0.01）,其作用与剂量有关。结论：通络化痰胶囊可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制细胞凋亡线粒体途径中凋亡相关CytC和caspase-3的表达有关。
