光谱法研究CTAB对木瓜酶酶活和构象的影响

《光谱实验室》 梁燕燕[1];龚福忠[1];周立亚[1];廖孙启[1]
摘要:
采用荧光光谱、圆二色谱(CD)和紫外光谱研究了十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)在NaHPO_4-NaH_2PO_4缓冲溶液中对木瓜酶构象变化及其酶活的影响,并探讨了CTAB与木瓜酶的作用机理。荧光光谱表明.在CTAB存在下,木瓜酶的荧光强度增强.荧光峰发生红移,CTAB使木瓜酶分子链趋于伸展,酪氨酸等发色基团更多地暴露在水中。CD谱表明.当CTAB浓度(C_(CTAB))为0.5 mmol/L时,木瓜酶的α-螺旋构象和β-折叠构象含量比纯木瓜酶(Papain)体系分别增加了1.3%和0.1%,回转构象和无定型构象含量则分别减少了0.3%和1.2%。酶活测定结果表明,CTAB对木瓜酶的酶活有较大影响。当C_(CTAB)由0增加到1.5mmol/L时,木瓜酶酶活由11.2×10~5U/g增大到16.3×10~5U/g,当C_(CTAB)由1.5mmol/L增加到3.5mmol/L,木瓜酶的酶活又由峰值(16.3×10~5U/g)降到11.7×10~5U/g,CTAB使木瓜酶酶活增强与木瓜酶的构象有序度提高有关。
木瓜酶 , 十六烷基三甲基溴化铵 , 酶活 , 荧光光谱 , 圆二色谱 , 构象
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