摘要:
为了鉴定拐枣七内生细菌Pseudomonas sp.GZJR-8的pqqE和GDH基因在溶磷方面的功能,该研究通过同源重组技术分别获得pqqE和GDH基因的缺失突变体ΔpqqE和ΔGDH,采用电转法获得它们的互补菌株ΔpqqE（pqqE）和ΔGDH（GDH）;难溶性无机磷培养基（PKO）定性检测结果显示,与野生型菌株（WT）相比,ΔpqqE和ΔGDH不能产生溶磷圈,ΔpqqE（pqqE）和ΔGDH（GDH）能够产生溶磷圈;抗坏血酸-钼蓝显色定磷法定量检测结果显示,WT、ΔpqqE、ΔpqqE（pqqE）、ΔGDH、ΔGDH（GDH）产生的有效磷总量分别为1 939.000 mg/L、1 279.000mg/L、1 999.000mg/L、439.000mg/L、2 314.000mg/L,与WT产生的有效磷总量相比,ΔpqqE降低1.52倍,ΔpqqE（pqqE）增加1.03倍,ΔGDH降低4.42倍,ΔGDH（GDH）增加1.19倍;培养液离心后上清的pH测定结果显示,WT、ΔpqqE、ΔpqqE（pqqE）、ΔGDH、ΔGDH（GDH）的pH分别为4.08、4.34、4.03、4.71、4.00,与WT的pH相比,ΔpqqE上升1.06倍,ΔpqqE（pqqE）降低0.27倍,ΔGDH上升1.15倍,ΔGDH（GDH）降低1.02倍。研究表明：pqqE和GDH基因具有溶磷能力,其中ΔpqqE和ΔGDH较WT的溶磷能力下降,但并未完全丧失溶磷能力,而ΔpqqE（pqqE）和ΔGDH（GDH）可以恢复到WT的溶磷能力,拐枣七内生细菌Pseudomonas sp.GZJR-8是通过产生酸性物质来溶磷,在农业生产方面具有潜在应用价值。
