辣根过氧化物酶标记兔抗丝状噬菌体衣壳蛋白抗体的制备与初步应用

《黑龙江畜牧兽医》 徐晶晶[1];李迪[1];曹永生[1];高明春[1];王君伟[1]
摘要:
为了制备用于噬茵体展示肽库的筛选及鉴定等环节的辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗丝状噬茵体(M13)衣壳蛋白抗体,试验制备了兔源的M13KE多克隆抗体,将多克隆抗体经饱和硫酸铵法和ProteinGResin层析柱纯化后运用过碘酸钠法对其进行辣根过氧化物酶标记,对标记前和标记后纯化产物进行活性测定,同时对标记后产物进行Western-blot鉴定,以及将其应用到验证已知的阳性噬茵体H11、H12、H14、H16、H18中。结果表明:兔抗M13KE多克隆抗体效价高于1:32000,标记后活性高于1:4000,标记抗体与已知阳性噬茵体的ELISA鉴定结果与前期测序结果一致。说明此酶标抗体有一定的应用价值。
M13KE噬菌体 , 酶标抗体 , 辣根过氧化物酶(HRP) , 酶联免疫吸附试验(ELISA)
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