摘要:
目的优化不同长度聚肌苷酸胞苷酸[polyinosinic acid：polycytidylic acid,poly（I∶C）]在HEK293T和BEAS-2B细胞中激活Ⅰ型干扰素（IFNβ）荧光素酶报告基因系统的实验条件。方法将质粒IFN-β-luc分别转染HEK293T及BEAS-2B细胞后,HEK293T细胞转染不同浓度（0.25、0.5、1.0、1.5和2.0μg/孔）的高分子量（HMW）poly（I∶C）和低分子量（LMW）poly（I∶C）,检测其对HEK293T细胞中IFNβ启动子激活的影响;BEAS-2B细胞直接加入不同浓度（0.1、1.0、10.0、20.0和50.0μg/孔）及转染不同浓度（同HEK293T细胞）的HMW poly（I∶C）和LMW poly（I∶C）,检测其对BEAS-2B细胞中IFNβ启动子激活的影响。结果 poly（I∶C）转染HEK293T细胞激活IFNβ启动子的最佳实验条件为：0.5μg/孔的HMW poly（I∶C）和LMW poly（I∶C）转染24 h。poly（I∶C）直接加入BEAS-2B细胞激活IFNβ启动子的最佳实验条件为：50μg/孔的HMW poly（I∶C）和LMW poly（I∶C）作用6 h;poly（I∶C）转染BEAS-2B细胞激活IFNβ启动子的最佳实验条件为：0.25μg/孔的HMW poly（I∶C）转染12 h,0.5μg/孔的LMW poly（I∶C）转染12 h。结论成功优化了poly（I∶C）在HEK293T和BEAS-2B细胞中激活IFNβ启动子的实验条件,为poly（I∶C）激活免疫反应机制的研究提供了实验依据。
