腹水草对人胃上皮细胞GES-1的保护作用及其对PKA、CREB、AQP1的调控研究

《浙江中医药大学学报》 徐艳山[1];赵伟春[1];王丹依[1];陈刚[2]
摘要:
[目的]研究腹水草(Veronicastrum axillare,V. axillare)含药血清对乙醇损伤的人胃上皮细胞(gastric epithelial cells-1,GES-1)的保护作用及其对环腺苷酸依赖性激酶(protein kinase A,PKA)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)、水通道蛋白1(aqua-porin 1,AQP1)表达水平的调控作用。[方法]20只雄性SD大鼠随机分为5组(n=4),连续灌胃给药14d,制备正常组(生理盐水20 mL·kg-1)、雷尼替丁组(0.027g·kg-1)以及V. axillare低、中、高剂量组(0.7、1.4、2.8 g·kg-1)含药血清。MTT法检测体外培养的GES-1细胞的活性,研究V. axillare含药血清及PKA抑制剂H-89(25μmol·mL-1)预处理对5%乙醇诱导GES-1细胞活力的影响。荧光定量RT-PCR检测PKA、CREB及AQP1 mRNA的表达水平,Western blot检测AQP1蛋白表达水平。[结果]模型组和H-89组GES-1细胞活性低于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);乙醇造模处理显著上调PKA、CREB及下调AQP1的表达水平,差异有统计学意义(P<0.01);H-89处理显著抑制PKA和CREB mRNA表达水平(P<0.01);加入各剂量V. axillare含药血清不能显著改善H-89对PKA、CREB和AQP1 mRNA表达水平的抑制作用。V. axillare中、高剂量含药血清细胞活性高于模型组,PKA、CREB mRNA表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01),而V. axillare中、低剂量含药血清AQP1表达水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]V. axillare含药血清显著减轻乙醇对GES-1细胞的损伤,对GES-1细胞具有保护作用,其保护机制与下调PKA、CREB及上调AQP1的表达有关。
V. , axillare , GES-1 , cAMP-PKA-CREB信号通路 , AQP1
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