摘要:
目的建立定量测定人纤维蛋白原中蔗糖含量的HPLC分析方法，对2010年版《中国药典》相关测定方法进行有益补充。方法采用WatersAlliance系统、Waters2414示差折光检测器、安捷伦ZorbaxCarbohydrateAnalysis色谱柱，以ACN-H2O（70：30）作为流动相，流速1．4mL·min-1，柱温30℃测定人纤维蛋白原中的蔗糖。并用该方法平行测定13批含有蔗糖的重组人凝血因子Ⅷ，与药典IEC-HPLC方法进行方法学比较。结果HPLC测定蔗糖对照品的保留时间RSD（n=6）为0．17％，峰面：织RSD（n=6）为0．09％。蔗糖在低（5mg·mL-1）、中（10mg·mL-1）、高（15mg·mL-1）3个质量浓度的回收率分别为96．2％，98．8％，100．3％，平均回收率为98．4％。蔗糖在2—20mg·mL-1（r=1．0000）内与峰面积呈良好的线性关系。2批人纤维蛋白原中的蔗糖含量分别为48．8，45．0g·L-1，均符合其40—60g·L-1的质量范围。平行测定的13批重组人凝血因子Ⅷ的蔗糖结果与药典IEC．HPLC测定结果的相关系数r为1．0000，两种方法无显著性差异（P〉0．05）。结论新建HPLC测定蔗糖含量方法的准确性和精密度良好，能够规避药典IEC-HPLC色谱条件下枸橼酸和蔗糖互相干扰的问题，本法可以适用于干热病毒灭活条件下人纤维蛋白原中蔗糖检测。
