转化生长因子β1对肝星状细胞活化及跨膜信号转导影响与舒肝颗粒的干预

《中国组织工程研究与临床康复》 吕沐瀚[1];李晓云[1];李昌平[1]
摘要:
背景:肝纤维化是一种可逆性的病变,及时地干预肝纤维化的病程能够减少肝硬化及其致命并发症的发生。肝星状细胞在肝纤维化发病机制中起主要作用。目的:采用舒肝颗粒作用于体外培养的大鼠肝星状细胞,观察其是否对转化生长因子β1促进肝星状细胞活化及跨膜信号转导有影响,以探讨其抗纤维化的作用机制。设计、时间及地点:对照观察细胞学实验,于2008-06/2009-02在泸州医学院分子中心实验室完成。材料:肝星状细胞株HSC-T6购自上海中医药大学肝病研究所,其表型为活化的肝星状细胞。舒肝颗粒由泸州医学院附属医院药物研究所提供,批号:20071120。方法:四甲基偶氮唑盐法测不同质量浓度(0.01,0.02,0.04,0.08 g/L)舒肝颗粒对HSC-T6细胞增殖情况的影响,选择对细胞增殖无影响的剂量(0.01 g/L)。再将HSC-T6细胞种板培养后,分为4组,空白对照组培养液中不加其他处理因素。转化生长因子β1组培养液中加入5 μg/L 转化生长因子β1液。舒肝颗粒组培养液中加入前面选择的0.01 g/L舒肝颗粒药液;联合用药组培养液中同时加入舒肝颗粒药液与转化生长因子β1液,剂量同上。主要观察指标:①肝星状细胞的形态。②免疫组织化学观察肝星状细胞表达Smad3和Smad7。③反转录-聚合酶链反应观察肝星状细胞活化及跨膜信号转导结果。结果:①转化生长因子β1组细胞形态类似于对照组,且伸展更明显,联合用药组,细胞形态更接近于转化生长因子β1组,各组均未见核固缩或凋亡现象。②免疫组织化学法测Smad3和Smad7在对照组分别表达较高;转化生长因子β1能轻度上调Smad3和Smad7的表达(P 〈 0.05);而舒肝颗粒组和联合用药组与对照组相比,Smad7表达上调更为显著,为对照组的1.99倍(P 〈 0.01)。③反转录-聚合酶链反应结果显示与对照组相比�
舒肝颗粒 , 肝星状细胞 , 细胞因子 , 肝纤维化 , TGF-β1 , SMAD3 , SMAD7
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