摘要:
目的:探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)诱导肿瘤细胞凋亡与存活蛋白(survivin protein)表达的关系.方法:采用细胞荧光染色、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳法和测定细胞浆Caspase-3的活性等手段检测肿瘤细胞暴露于不同浓度的Art时,对肿瘤细胞凋亡的诱导作用;用RT-PCR、Western Blotting法,检测不同浓度的Art作用于肿瘤细胞时,对survivinmuRNA和survivin蛋白表达的影响.结果:HL60细胞暴露于Art时,呈现典型细胞凋亡特征,如:胞核固缩、形成凋亡小体;凋亡细胞的比例呈浓度依赖性增高;琼脂糖电泳出现明显的'梯状'条带;细胞浆Caspase-3的活性呈浓度依赖性增高等.RT-PCR检测表明,A549细胞暴露于Art 10和50 g·L-172 h后,survivin mRNA的表达呈浓度依赖性降低,对照组、10和50 mg·L-1处理组的survivin条带和内标GAPDH条带灰度的比值分别为1.745、0.390和0.023;Western Blotting法也检测到Art抑制Survivin蛋白的表达.结论:Art诱导肿瘤细胞发生凋亡,激活Caspase-3途径,可能与抑制survivin基因表达有关.
