蛋白质组学方法研究唐草片对微粒体CYP450酶的影响

《中国中药杂志》 张丽军[1,2];贾小芳[2];尹林[2];刘晓茜[2];沈银忠[2];卢洪洲[2];程能能[1]
摘要:
艾滋病(AIDS)患者常用唐草片进行辅助甚至替代治疗,然而中药成分复杂,其对抗病毒药物的影响及其作用机制尚不清楚。CYP450酶是药物的主要代谢酶,因此,研究中药唐草片与依非韦伦联合用药前后对CYP450酶的调控具有重要意义。蛋白质组学以其高通量高灵敏度的特点被广泛用于代谢酶的研究。该文采用差速离心法分离肝微粒体,SDS-PAGE分离其蛋白质,切取CYP450所在的3条电泳带,用液相色谱串联质谱进行鉴定,一共鉴定了16个CYP450同工酶。为了定量分析唐草片对CYP450酶的影响,采用基于质谱的多反应监测技术(MRM)。根据蛋白质的质谱鉴定结果,选择CYP2C11。其特征多肽通过Expasy blast搜索获得。片断离子的m/z〈800。该文CYP2C11的离子对的m/z为711.5/232.1,711.5/319.2,711.5/466.2 和711.5/595.3;内标(IS)ESAT-6肽的m/z为735.5/215.3,735.5/389.3,735.5/460.3,735.5/524.3。采用相对峰(分析物/内标)面积进行相对定量分析。与EFV单独给药组相比,在EFV与唐草片合并用药组中CYP2C11上调了1.6倍。该文结果显示唐草片可能通过调节代谢酶如CYP2C11来调控药物代谢,但具体机制有待深入研究。
唐草片 , 蛋白质组 , CYP450 , 依非韦伦
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